டச்சு ஆராய்ச்சியாளர்கள் CRISPR மற்றும் பயோலுமினென்சென்ஸ் ஆகியவற்றை ஒரு சோதனை சோதனையில் இணைக்கின்றனர்தொற்று நோய்கள்

நெதர்லாந்தில் உள்ள ஆராய்ச்சியாளர்களின் கூற்றுப்படி, புதிதாக உருவாக்கப்பட்ட இரவு நேர புரதம் வைரஸ் நோய்களைக் கண்டறிவதை விரைவுபடுத்துகிறது மற்றும் எளிதாக்குகிறது.
ACS பப்ளிகேஷன்ஸில் புதன்கிழமை வெளியிடப்பட்ட அவர்களின் ஆய்வு, வைரல் நியூக்ளிக் அமிலங்கள் மற்றும் ஒளிரும் பிரகாசமான நீலம் அல்லது பச்சை புரதங்களைப் பயன்படுத்தி அவற்றின் தோற்றத்தை விரைவாக பகுப்பாய்வு செய்வதற்கான ஒரு முக்கியமான, ஒரு-படி முறையை விவரிக்கிறது.
நியூக்ளிக் அமில கைரேகைகளைக் கண்டறிவதன் மூலம் நோய்க்கிருமிகளை அடையாளம் காண்பது மருத்துவ நோயறிதல், உயிரியல் மருத்துவ ஆராய்ச்சி மற்றும் உணவு மற்றும் சுற்றுச்சூழல் பாதுகாப்பு கண்காணிப்பு ஆகியவற்றில் ஒரு முக்கிய உத்தியாகும்.பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் அளவு பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (PCR) சோதனைகள் அதிக உணர்திறன் கொண்டவை, ஆனால் அதிநவீன மாதிரி தயாரிப்பு அல்லது முடிவுகளின் விளக்கம் தேவை, சில சுகாதார அமைப்புகள் அல்லது வள-வரையறுக்கப்பட்ட அமைப்புகளுக்கு அவை நடைமுறைக்கு மாறானவை.
நெதர்லாந்தைச் சேர்ந்த இந்தக் குழு, பல்வேறு அமைப்புகளில் பயன்படுத்தக்கூடிய வேகமான, கையடக்க மற்றும் பயன்படுத்த எளிதான நியூக்ளிக் அமிலம் கண்டறியும் முறையை உருவாக்குவதற்கு பல்கலைக்கழகங்கள் மற்றும் மருத்துவமனைகளைச் சேர்ந்த விஞ்ஞானிகளின் ஒத்துழைப்பின் விளைவாகும்.
அவை மின்மினிப் பூச்சிகள், மின்மினிப் பூச்சி பளபளப்புகள் மற்றும் நீர்வாழ் பைட்டோபிளாங்க்டனின் சிறிய நட்சத்திரங்களால் ஈர்க்கப்பட்டன, இவை அனைத்தும் பயோலுமினென்சென்ஸ் எனப்படும் ஒரு நிகழ்வால் இயக்கப்படுகின்றன.லூசிஃபெரேஸ் புரதம் சம்பந்தப்பட்ட இரசாயன எதிர்வினையால் இந்த ஒளிரும் விளைவு ஏற்படுகிறது.விஞ்ஞானிகள் லூசிஃபெரேஸ் புரதங்களை சென்சார்களில் இணைத்தனர், அவை இலக்கைக் கண்டுபிடிக்கும் போது அவதானிக்க வசதியாக ஒளியை வெளியிடுகின்றன.இது இந்த சென்சார்களை பாயிண்ட்-ஆஃப்-கேர் கண்டறிதலுக்கு ஏற்றதாக மாற்றும் அதே வேளையில், அவை தற்போது மருத்துவ நோயறிதல் சோதனைகளுக்குத் தேவையான அதிக உணர்திறனைக் கொண்டிருக்கவில்லை.CRISPR மரபணு திருத்தும் முறை இந்த திறனை வழங்க முடியும் என்றாலும், சிக்கலான, சத்தமில்லாத மாதிரிகளில் இருக்கும் பலவீனமான சிக்னலைக் கண்டறிய பல படிகள் மற்றும் கூடுதல் சிறப்பு உபகரணங்கள் தேவைப்படுகின்றன.
ஒரு எளிய டிஜிட்டல் கேமரா மூலம் கண்டறியக்கூடிய பயோலுமினசென்ட் சிக்னலுடன் CRISPR தொடர்பான புரதத்தை இணைக்க ஆராய்ச்சியாளர்கள் ஒரு வழியைக் கண்டுபிடித்துள்ளனர்.பகுப்பாய்விற்கு போதுமான ஆர்என்ஏ அல்லது டிஎன்ஏ மாதிரி இருப்பதை உறுதிசெய்ய, ஆராய்ச்சியாளர்கள் ரீகாம்பினேஸ் பாலிமரேஸ் ஆம்ப்ளிஃபிகேஷன் (ஆர்பிஏ) ஒரு எளிய நுட்பத்தை மேற்கொண்டனர், இது சுமார் 100 டிகிரி பாரன்ஹீட் நிலையான வெப்பநிலையில் செயல்படுகிறது.அவர்கள் Luminescent Nucleic Acid Sensor (LUNAS) எனப்படும் ஒரு புதிய தளத்தை உருவாக்கினர், இதில் இரண்டு CRISPR/Cas9 புரதங்கள் வைரஸ் மரபணுவின் வெவ்வேறு தொடர்ச்சியான பகுதிகளுக்கு குறிப்பிட்டவை, ஒவ்வொன்றும் அவற்றுடன் ஒரு தனித்துவமான லூசிஃபெரேஸ் துண்டுடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளன.
புலனாய்வாளர்கள் ஆய்வு செய்யும் குறிப்பிட்ட வைரஸ் மரபணு இருக்கும்போது, ​​இரண்டு CRISPR/Cas9 புரதங்கள் இலக்கு நியூக்ளிக் அமில வரிசையுடன் பிணைக்கப்படுகின்றன;அவை அருகாமையில் இருக்கும், அப்படியே லூசிஃபெரேஸ் புரதம் உருவாகி ஒரு இரசாயன அடி மூலக்கூறு முன்னிலையில் நீல ஒளியை வெளியிட அனுமதிக்கிறது..இந்த செயல்பாட்டில் நுகரப்படும் அடி மூலக்கூறைக் கணக்கிட, ஆராய்ச்சியாளர்கள் பச்சை ஒளியை வெளியிடும் கட்டுப்பாட்டு எதிர்வினையைப் பயன்படுத்தினர்.பச்சை நிறத்தில் இருந்து நீல நிறத்தை மாற்றும் ஒரு குழாய் நேர்மறையான முடிவைக் குறிக்கிறது.
கண்டறியும் RPA-LUNAS மதிப்பீட்டை உருவாக்குவதன் மூலம் ஆராய்ச்சியாளர்கள் தங்கள் தளத்தை சோதித்தனர்SARS-CoV-2 RNAகடினமான ஆர்என்ஏ தனிமைப்படுத்தல் இல்லாமல், மற்றும் நாசோபார்னீஜியல் ஸ்வாப் மாதிரிகளில் அதன் கண்டறியும் செயல்திறனை நிரூபித்ததுCOVID-19நோயாளிகள்.RPA-LUNAS ஆனது SARS-CoV-2 ஐ 20 நிமிடங்களுக்குள் 200 பிரதிகள்/μLக்கு குறைவான RNA வைரஸ் சுமை கொண்ட மாதிரிகளில் வெற்றிகரமாகக் கண்டறிந்தது.
ஆராய்ச்சியாளர்கள் தங்கள் மதிப்பீடு பல வைரஸ்களை எளிதாகவும் திறமையாகவும் கண்டறிய முடியும் என்று நம்புகிறார்கள்."RPA-LUNAS பாயிண்ட்-ஆஃப்-கேர் தொற்று நோய் சோதனைக்கு கவர்ச்சிகரமானது" என்று அவர்கள் எழுதினர்.